细胞培养是指在体外模拟体内环境,使之生存、生长、繁殖并维持主要结构和功能的一种方法。细胞的生长需要特定的条件,在细胞培养瓶中培养细胞时,需要哪些条件呢?
1.无菌环境
无毒和无菌是体外培养细胞的首要条件。在细胞培养瓶内培养细胞,缺乏机体免疫系统的保护而丧失对微生物的防御能力和对有害物质的解毒能力,为保证细胞能在体外环境中生长繁殖,必须要确保无菌工作区域、良好的个人卫生、无菌试剂和培养基以及无菌操作。
2.合适的温度
一般哺乳类与禽类细胞在体外培养的适宜温度是37~38℃,不适宜的环境温度会影响细胞的生长。
3.适宜的渗透压
高渗溶液或低渗溶液会引起细胞发生褶皱、肿胀、破裂。因此,渗透压是体外培养细胞的重要条件之一。多数体外培养的细胞对渗透压都有一定的耐受能力,实际应用中,260~320mmol/L的渗透压可适用于大多数细胞。
4.气体环境与pH
细胞的体外培养需要理想的气体环境,氧气、二氧化碳是细胞生存的必要条件。氧气参与细胞的三羧酸循环,为细胞生存、代谢与合成提供能量;二氧化碳既是细胞的代谢产物,是细胞生长的必需成分,又与维持培养液的pH有关。大多数细胞适宜的pH范围往往是7.2~7.4。在开放式培养中,以5%的二氧化碳气体比例为宜。
以上是细胞培养瓶中细胞生长的四个条件,也是确保细胞良好生长状态的必要因素,我们在操作的时候尤其要注意无菌操作,避免污染细胞。
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