在细胞苗抗原生产中，"转瓶的种植"通常指将细胞转瓶内，使其贴壁生长形成单层，为后续病毒接种和抗原生产做准备。这个过程的核心在于让细胞在转瓶内壁健康、均匀地生长。

细胞转瓶2.5L

细胞传代与接种

此阶段的目标是获得数量准确、活性良好的细胞悬液。

细胞消化：当用于接种的细胞（如牛睾丸原代细胞）在培养瓶内长成致密单层后，需要使用EDTA-胰酶细胞分散液进行消化。关键是要控制好消化的程度，避免消化不足（细胞无法有效脱落）或消化过度（损伤细胞活性）。

细胞计数与稀释：消化后，需要对细胞进行计数，并将其稀释至适宜的浓度。例如，后续传代时，可能会按1:3至1:5的比例制成细胞悬液。接种浓度直接影响细胞在转瓶内长成单层的时间和密度。

转瓶培养与控制

这是细胞在转瓶内贴壁生长的关键阶段。

培养条件：将细胞悬液接种到转瓶后，需要加入适量的培养基（通常占转瓶容积的约十分之一），塞紧瓶口，置于36–37℃的环境中进行旋转培养。转瓶的缓慢旋转（例如10–12转/小时）​ 至关重要，它能使细胞和培养基均匀分布，有助于营养物质交换和细胞均匀贴壁。

生长监测：培养约3–5天后，细胞通常可以长成良好的单层。在此期间，需要定期在显微镜下观察细胞的生长状态和形态，确保其健康无污染。

细胞转瓶5L

关键影响因素

细胞类型特异性：不同的细胞系在转瓶中的生长特性可能不同。例如，用于培养猪瘟病毒的ST细胞（猪睾丸细胞）和用于培养牛病毒性腹泻病毒（BVDV）的MDBK细胞（牛肾细胞），它们的最佳接种密度、生长液配方（如MEM培养基或DMEM培养基）以及形成单层所需时间可能需要根据具体情况进行优化。

培养基与血清：培养基是细胞生长的营养基础。除了基础培养基，血清的质量至关重要。务必选择来源清晰、经过严格检测（如确保无牛病毒性腹泻病毒BVDV等特定病原体污染）的血清。血清浓度也会影响细胞生长，例如在ST细胞培养中，生长液血清浓度可能维持在8%-10%，而接毒后的维持液血清浓度会降低至2%左右。

污染控制：这是生产中的重中之重。所有操作必须在无菌环境下进行，对工作区、器具、试剂等严格执行消毒和清场规程，并对细胞培养物进行无菌检验、支原体检验等，确保无外源微生物污染。

褶皱细胞转瓶

"转瓶种植"的成功依赖于对细胞特性、培养条件和无菌操作的精细控制。随着技术进步，一些新的方法也被探索用于改进传统工艺，例如在细胞传代消化时使用震荡器代替人工甩瓶以降低劳动强度和污染风险。不过，扎实掌握并严格执行上述基本要点，始终是获得高质量细胞苗抗原的基石。