我们在发现细胞培养瓶中出现了污染的原因排查一般都是采用单一变量法，先把每种试剂：基础培养基、FBS、PBS、完全培养基、不加双抗的完全培养基和冻存液吸取少量到6孔板，放在培养箱过夜/2天（因为4℃冰箱温度低不利于细菌的生长，拿来涂片不易找得到。如果肉眼和显微镜看不到细菌污染也不能排除污染，因为细菌会依附在细胞上，空培没有细胞，细菌又很小很难看到，所以最长可放置7天，若7天后还没有污染迹象就可以排除！）。

我们在使用细胞工厂等细胞培养耗材进行细胞培养时，如果出现细胞污染的情况下，我们这段时间的努力可能都会白费。那我们如何分辨这些污染的情况呢？今天富道细胞就跟大家分享一下。

我们之前介绍了细胞工厂培养细胞时常见的污染，今天富道细胞就来跟大家说一下细胞工厂预防细胞污染及补救方法。我们应对细胞工厂内出现污染最好对策是预防，这一点是毋庸置疑的。所以我们在培养时细胞要勤快，平时所用到的一次性耗材不可重复使用，使用辅助的器皿等要及时高压灭菌，灭菌后超过一周未使用也应重新灭菌。

我们在使用细胞工厂等细胞培养耗材培养细胞时都有可能会发现细胞污染富道细胞总结了一些常见细胞工厂的分类它们分别为：细菌污染、真菌污染、霉菌污染，支原体污染。细菌污染一般是芽孢杆菌、葡萄球菌造成的，污染的主要特征为细胞工厂等细胞培养耗材中培养基变黄、浑浊，低倍镜下呈沙粒状布满细胞间隙或培养基，高倍镜下可见杆状或球状的细菌在培养基中游动（与细胞碎片的布朗运动明显不同）。需注意的是，在污染初期，细菌常成群存在，不一定会有明显的运动，此时需引起警惕。

我们立即弃去细胞培养瓶中的培养基，以PBS润洗2~3次，加入胰酶处理至细胞形态略有改变但未脱离容器时弃去胰酶，加入PBS轻轻润洗1遍； 在细胞培养瓶中加入20×双抗，浸泡细胞3~5min，弃去双抗，并加入新鲜的完全培养基（含10×双抗）培养12h；12h弃去培养基以PBS润洗2~3遍后加入完全培养基（含10×双抗），传代时以较小转速离心（如平时以1000r/min离心，则可降为800~900r/min离心），仍以含10×双抗的培养基培养。

我们在使用细胞摇瓶培养一些悬浮细胞抱团生长是正常现象，大部分悬浮细胞在细胞密度很高的情况下，很可能会出现部分细胞抱团生长的现象，聚团细胞很容易死亡并演化成絮状物，殃及周围的悬浮细胞，因此在培养悬浮细胞时需控制好细胞密度。

我们是使用细胞工厂这种大规模细胞培养耗材时是进行的贴壁细胞培养，那么如果出现贴壁细胞不贴壁了我们该怎么做呢？今天富道细胞来跟大家分享一下细胞工厂培养细胞时不贴壁的六种解决方案：

我们在使用细胞工厂时对生长到一定程度的细胞就到了收获的时候了，这时候就需要借助胰酶对细胞工厂上的细胞进行消化后再收获一般使用trypsin-EDTA 浓度为 0.25％ trypsin-0.53 mM EDTA.2Na 或0.05％trypsin-0.02 mM EDTA.2Na。首先我们先介绍一下胰酶：胰酶储存的环境一般在–20°C左右，我们在解冻胰酶的普遍是在 4°C 的环境中进行，我们在第一次开瓶后应立即将胰酶少量分装于无菌试管中，并保存于 –20°C环境中，这种操作是将反复冷冻解冻造成

我们在使用细胞培养瓶培养细胞时出现的问题，无非是细胞出现污染和细胞本身出现了问题，我们在之前的文章中讲述了细胞培养过程出现污染的情况，今天富道细胞来跟大家介绍一下细胞本身的两个问题和解决办法。

细胞工厂是一种大规模细胞培养容器，它采用多层结构设计，节省厂房空间，在生物制药、疫苗生产等领域发挥着重要作用。在其实不止应用于培养细胞，还可用于病毒的瞬时转染，在溶瘤病毒疗法中也用到了这种细胞培养耗材。

血清是细胞生长所需的营养物质，它为细胞提供各种生长因子、结合蛋白，对培养中的细胞起到保护作用。PETG血清瓶是储存血清的专用包装容器，有时候我们会发展在瓶子内部有一些沉淀物质，这些物质主要是磷酸钙或者纤维蛋白。

细胞培养瓶中细胞摇瓶由PC或PETG原料生产而成，作为一种细胞培养容器，其生产原料直接关系到成品的质量，进而会影响到后期的细胞培养实验。因此，要对这种耗材做溶出物试验，以确保原料的安全性。

细胞工厂是一种应用非常普遍的大规模培养容器，疫苗制备、蛋白生产、细胞与基因治疗等领域都会用到这种耗材。在培养细胞时，污染问题是业内普遍关注的问题，那么如何降低污染呢？

我们在使用细胞培养瓶进行细胞培养过程中，细胞周围包括细胞上有很多小黑点，我们应该采取什么措施呢？首先我们知道细胞培养瓶中有很多小黑点一般可以判定为细胞碎片、杂质、黑胶虫污染，如果判定为细胞碎片或杂质那我们可以根据悬浮培养和贴壁培养进行已下处理方式：细胞培养瓶进行悬浮细胞过程中出现杂质的情况首先收集细胞上清慢速离心（500~600 rpm/min，5~6 min）并更换新的细胞培养瓶。

大家在使用细胞培养瓶进行细胞培养时可谓是谈”污”色变，在进行培养的过程中如果发现疑似污染的时候都会有种悲不自胜的感觉。今天富道细胞就给大家介绍一下细胞培养瓶进行细胞培养常见情况并对这种情况出现后应该采取哪种措施呢？

生命科学领域的飞速发展让细胞培养技术得到了更加广泛的应用，细胞培养瓶是细胞培养试验中应用较多一类耗材，它既可以用于细胞的复苏和小规模的细胞扩增，也可以用于贴壁细胞的扩增。随着加工工艺的不断改进与完善，这些耗材也在不断进行创新，以更好的适应研究人员的使用需求，细胞培养瓶上的盖子选择上就有密封盖和透气盖，今天富道细胞的小编就跟大家分享一下细胞培养瓶密封盖和透气盖的区别。